Caracterización molecular de distrofinopatías en el hospital del niño “Dr. Francisco de Icaza Bustamante”, Guayaquil, Ecuador
Sancan-Jalca, Betancourt-Castellanos, Galarza-Brito
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Facultad de Ciencias de la Salud. Universidad Técnica de Manabí. Portoviejo, Ecuador
proyecciones poblacionales es la segunda ciudad más poblada del Ecuador, por lo tanto, es
estadísticamente más probable la aparición de dicha enfermedad
24
.
Las manifestaciones clínicas más frecuentes fueron: trastorno de la marcha, 18 (94,7 %), debilidad
muscular 15 (78,9 %), retraso global del desarrollo, 6 (31,5 %), discapacidad intelectual, 4 (21 %) y
dolor muscular, 3 (15,7 %). Las características clínicas de las distrofinopatías DMD/BMD siguen un
curso predecible en la mayoría de los casos, la ausencia o defecto funcional en la proteína distrofina,
conlleva a la degeneración muscular progresiva, es por ello que el trastorno de la marcha (94,7 %) y
la debilidad muscular (78,9 %) fueron las características más preponderantes en los pacientes; lo cual
concuerda con otros estudios internacionales
8
. Hay reconocimiento de que la distrofina juega un papel
crítico en el desarrollo y función del cerebro, encontrándose el retraso global del desarrollo (31,5 %),
discapacidad intelectual (21 %) y autismo (5,2 %) en nuestros pacientes; lo cual sugiere que la
disfunción de la distrofina afecta a vías cruciales del neurodesarrollo durante la infancia
25
.
Con el análisis molecular se logró detectar variantes genéticas (Tabla 2) de tipo
deleción/duplicación de exones en el gen de la distrofina, mediante la técnica MLPA. En 9 pacientes
se encontraron deleciones (45 %) y en 3 pacientes duplicaciones (15 %). En el resto de los pacientes,
en los cuales el MLPA fue negativo, se realizó secuenciación masiva del gen DMD, encontrándose
mutaciones puntuales en 8 pacientes (40 %) (Tabla 3), de los cuales 6 correspondieron a variantes sin
sentido (75 %) y 2 probados a mutaciones en el sitio de corte y empalme (25 %). En el primer estudio
realizado en Ecuador con pacientes y portadora de DMD, las alteraciones genéticas detectadas
correspondieron a deleciones de 6 exones, entre los exones 45 a 51, con la pérdida delimitada por la
conservación de los exones 44 y 5215.
Tabla 2.
Variantes patogénicas identificadas en pacientes con distrofinopatías.
Variante patogénica
Frecuencia
Porcentaje
Deleción
9
45
Mutaciones puntuales
8
40
Duplicación
3
15
Total
20
100
En otro estudio de Quito-Ecuador con una cohorte de 7 pacientes, encontraron 4 duplicaciones y 3
deleciones, solo utilizaron las técnicas PCR multiplex y MLPA
14
. En la provincia de Holguín-Cuba,
se realizó un estudio en 12 pacientes mediante la técnica PCR multiplex, el 33,3 % de los pacientes
presentaron variantes patogénicas, dadas por deleciones; en el restante 66,7 % no se pudo detectar
deleción en los exones estudiados
26
. En Colombia estudiaron a 62 pacientes, en el 75 % se detectaron
variantes tipo deleción/duplicación mediante MLPA y a través de la secuenciación del gen DMD se
evidenciaron mutaciones sin sentido en el 9,6 %, mutaciones que afectan el marco de lectura en el 11
% y mutaciones que afectan el corte y empalme en el 3,2 %
8
. A pesar de ser las
deleciones/duplicaciones las más frecuentes es muy importante tener a disposición la secuenciación
del gen DMD en caso de que el MLPA o el PCR multiplex sea negativo.
En 5 individuos se encontró la deleción de 2 o más exones (25 %), en 3 individuos solo 1 exón
estaba afectado (15 %), en los 3 que presentaron duplicaciones, estas involucraron 1 exón, más de 2
exones y uno la duplicación fue intrónica. Los pacientes con variantes sin sentido identificadas con
su correspondiente afectación en la proteína DMD son tributables a la medicación Ataluren
(medicamento huérfano). En 2 pacientes se encontró la afectación el sitio de corte y empalme, el cual
no tiene indicación de tratamiento molecular.
Dentro de las variantes patogénicas puntuales encontramos, las sin sentido, que correspondieron a
6 pacientes (30 %); estas variantes son susceptibles de tratamiento molecular ya que ocasionan un
codón de parada prematuro produciendo una distrofina disfuncional por lo que se ha diseñado nuevas
moléculas que estimulan la lectura del codón de parada (Ataluren)
27
, permitiendo al ribosoma ignorar